基因突变和拷贝数变异是遗传病发生的主要遗传学基础，也是遗传病检测的主要靶标。遗传病的复杂性伴随着基因突变数目多、类型广；基因拷贝数变异不仅表现为缺失和，而且缺失位置、大小以及倍数都呈现多样性。遗传变异的复杂性为遗传病的临床检测提出了技术挑战。实时PCR技术是我们近发展起来新一代实时PCR技术，利用荧光标记或熔点分析，可以在单个反应管内检测多个靶标。
示例：人Y染色体AZF区微缺失检测。
方法学：荧光PCR法。
用途：本产品用于定性检测男性全血样本中 Y 染色体无症因子。（azoospermia
factor，AZF）区域是否存在缺失，具体检测缺失位点为：AZFa：sY84、sY86；AZFb：sY127、sY134；AZFc：sY254、sY255；AZFd：sY145、sY152。
临床研究表明，Y 染色体 AZF 区（AZFa, AZFb, AZFc,AZFd）不同程度的缺失可导致男性的、无精症或畸形等症状，从而导致。本试剂盒可辅助诊断确诊患者的病因分析，检测结果仅供临床参考，不能单独用做确诊或排除病例等临床诊断的依据。
标本类型：全血。
检测流程：
（1）样本处理及 DNA 提取（在标本制备区完成）→（2）样本处理及 DNA 提取（在标本制备区完成）→（3）加样（在标本制备区完成）→（4）PCR
扩增（在扩增区完成）→（5）结果分析与判定。
其他同类项目：地贫、、尿症（PKU）、蚕豆病（G6PD）、脊髓型肌萎缩（SMA）、进行性肌营养不良（DMD）、（HLA）、血友病。
适合开展的医院和：妇幼、第三方、各种级别的有需求的医院。
1.弱阳性质控：需要准备弱阳性质控，包括标准物质、第三方质控或弱阳性样品用于进行性能质控和抑制物质控。
2.阴性质控：需要准备确定阴性的样品或空白对照，用于进行污染物的质控。
3.重复次数n：中国人喜欢3(三顾茅庐),6（六六大顺）,8（）,9（九九），很遗憾这些数和实验室都关系不太大。符合统计学计算的的两个数字是5和20,5通常是能进行统计学分析的少重复次数，20通常用于计算95%的置信区间。大家根据自己的需要选择合适的重复次数。
（1）渗漏密闭性：将n个PCR管加入半量墨汁，盖好盖子后放入水中，浸泡30min，没有墨汁渗出为合格。
（2）离心密闭性：将n个PCR管加入半量纯水，放入离心机，1000 rpm，30min，管盖未崩开未漏液为合格。
（3）热密闭性：将n个PCR管加入半量纯水，盖好盖子称重后放入PCR仪，设置一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，再进行称重，PCR管未变形，管盖未崩开未漏液，前后重量未变化为合格。
（4）冷密闭性：将n个PCR管加入半量纯水，放入-20℃冰箱，24h，离心管未变形，管盖未崩开未漏液为合格。
（5）污染物质检：将n个PCR管加入半量阴性纯水，盖好盖子涡旋1 min后静置5min，作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。
（6）抑制物质检：将n个PCR管分别加入弱阳性质控物,室温静置5min，然后进行提取;RNA核酸，DNA核酸，室温静置5min，作为模板进行扩增，qPCR扩增未被抑制为合格。
（7）空白荧光通透性：对于qPCR,需要考察PCR管是否有非特异性荧光信号，将n个空PCR管，盖好盖子后放入PCR仪，设置一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，qPCR无扩增为合格。
（8）阳性荧光通透性：对于qPCR,还需要考察PCR管是否会抑制荧光的通透性，将n个含弱阳性样品和扩增试剂的PCR管，与确认无荧光干扰的PCR管，盖好盖子后放入PCR仪一同扩增，设置一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，qPCR扩增未被抑制为合格。
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